Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Архив автора

Tobey и Crissman (1975) также доказали, что клетки культуры СНО в стационарной фазе более чувствительны к бисрхлорэтилнитрозомочевине и другим производным нитрозомочевины, чем клетки в растущей культуре.
Barranco с соавторами (1973в) показали, что культура СНО в стационарной фазе характеризуется повышенной чувствительностью к блеомицину. После воздействия блеомицина в концентрации 100 мкг/мл в течение часа выжившая фракция в стационарной культуре была в 10 раз меньше, чем в активно растущей. Hahn с соавторами (1973) указывают, что клетки, вышедшие из цикла, характеризуются повышенной чувствительностью к блеомицину.

В ряде работ показана значительно более высокая чувствительность стационарной культуры по сравнению с активно растущей к бисрхлорэтилнитрозомочевине и блеомицину. Hagemann с соавторами (1973) показали, что в культуре мастоцитомы плечо на кривой дозаэффект имеется только в логарифмической фазе роста, в которой также несколько больше величина D0. В результате этого гибель клеток начиналась в логарифмической фазе роста при значительно большей концентрации препарата. Выжившая фракция снижалась до 0,01 в логарифмической и стационарных фазах роста при наличии в среде бисрхлорэтилнитрозомочевины в концентрации 20 и 10 мкг/мл соответственно. Barranco с соавторами (1973в) описали еще более резкое различие чувствительности к бисрхлорэтилнитрозомочевине к культуре в логарифмической и стационарной фазах роста. В стационарной культуре клеток СНО хомячка воздействие препарата в течение часа в концентрации 25 мкг/мл снижало выжившую фракцию до 0,02. На культуру в логарифмической фазе роста такое воздействие вообще не влияло и лишь при повышении концентрации препарата до 100 мкг/мл выжившая фракция снижалась до 1 10. При этом так же, как и в культуре мастоцитомы, в культуре СНО значительное плечо 78 в кривой дозаэффект наблюдалось только в логарифмической фазе роста. Эти данные указывают на пониженную способность клеток в стационарных культурах к репарации сублетальных повреждений.

Стационарная культура клеток была менее чувствительна к адриамицину, чем экспоненциально растущая культура при больших дозах антибиотика выжившая фракция снижалась до 4 и 0,01 соответственно (Barranco, Novae, 1974). Все же адриамицин вызывал гибель большинства покоящихся клеток, что указывает на целесообразность применения этого препарата для лечения опухолей с небольшим пролиферативным пулом.
Таким образом, в этих работах показано, что к алкилирующим соединениям, актиномицину D и адриамицину, чувствительность культуры в стационарной фазе меньше или одинакова с чувствительностью в логарифмической фазе, а к антиметаболитам чувствительность в стационарной культуре всегда значительно меньше.

Информацию о чувствительности клеток в фазе G0 дает сравнение гибели клеток в культурах в логарифмической и стационарной фазах роста и в опухолях на различных стадиях роста. Часть работ, в которых проводилось такое сравнение, рассматривалась выше. Культура лимфобластов L5178Y в логарифмической фазе роста была значительно более чувствительна к эмбихину, чем культура в стационарной фазе (Goldenberg е. а., 1971). Культура клеток СНО в стационарной и экспоненциальной фазах роста была одинаково чувствительна к эмбихину (Ray е. а., 1973). Стационарная культура лейкемии L1210, полученная при переносе клеток в солевой раствор, была высокочувствительна к бисрхлорэтилнитрозомочевине, хотя не ясно, насколько эта чувствительность отличается от чувствительности активно растущей культуры (Wilkoff е. а., 1972). Культура клеток хомячка в логарифмической и стационарной фазах роста была одинаково чувствительна к бисрхлорэтилнитрозомочевине и актиномидину D (Thatcher, Walker, 1969). Культура клеток в стационарной фазе роста была малочувствительна или вообще не чувствительна к антиметаболитам 5фторурацилу (MadocJones, Bruce, 1968), метотрексату (Borsa, Whitmore, 1969; Hryniuk е. a., 1969), арабинозилцитозину и оксимочевине (Wilkoff е. а., 1972; Barranco, Novae, 1974).

Чувствительность клеток в фазе покоя Все приведенные выше работы, в которых изучалась зависимость выжившей фракции клеток от фазы цикла, были выполнены на синхронных культурах в логарифмической фазе роста. Поэтому в данных работах сравнивались чувствительность фаз Gi, S, G2 и М, а так называемая фаза пролиферативного покоя G0 оставалась без внимания. Число клеток в фазе покоя является особенно значительным в опухолях на поздних стадиях роста и в медленно растущих опухолях. В большинстве изученных солидных опухолях человека число таких клеток довольно велико (О. С. Франкфурт, 1975а). Распространена точка зрения, что именно нечувствительность клеток в фазе покоя к химиотерапевтическим препаратам определяет относительную резистентность многих солидных опухолей (Skipper, 19716, 1973). Поэтому данные о влиянии химиотерапевтических препаратов на клетки в фазе покоя G0 имеют большое значение.