Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Архив рубрики «Совместимость»

Изучение влияния на цикл метотрексата и 5фтор2′дезоксиуридина показало, что в различных типах клеток ингибиторы тимидилатсинтетазы не влияют на клетки, находящиеся в конце фазы S. а в некоторых типах клеток даже в середине фазы S и что особенно чувствительны к этим ингибиторам клетки в ранней фазе S.
Антиметаболит ‘дезокситиогуанозин, включающийся в. ДНК, не влиял на клеточный цикл в синхронной культуре клеток СНО хомячка (Barranco, Humphrey, 19716). Даже клетки в ранней фазе S, 89 которых погибали после кратковременного воздействия антиметаболита, проходили фазы S, G2 и митоз за нормальное время. Это, пожалуй, единственный случай, когда значительная гибель клеток не сопровождалась нарушениями в цикле.

Оксимочевина, специфический ингибитор синтеза ДНК, в опухолях молочных желез мышей in vivo тормозила синтез ДНК на 45 ч (Dethlefsen, Riley, 1973). Митотическая активность была резко снижена через 9′/2 ч после введения оксимочевины, затем быстро восстанавливалась и достигала максимума через 1314 ч, т. е. через период, суммарно равный времени блокирования, плюс ts (8 ч) и te2 (2 ч). Следовательно, оксимочевина полностью тормозила переход клеток по фазе S, а после прекращения блокирования клетки проходили фазы цикла с обычной длительностью.

Рассмотрим работы, в которых изучалось влияние на клеточный цикл нескольких антиметаболитов и ингибиторов синтеза ДНК и были установлены общие закономерности нарушения в цикле при действии этих соединений. Wheeler с соавторами (1972) изучали методом колцемидового блока влияние на клеточный цикл в культуре НЕр2 арабинозилцитозина, оксимочевины, гуаназола, метотрексата, 5фтор2′дезоксиуридина, 5фторурацила, 6меркаптопурина, 6тиогуанина и 6метилтиопуринрибонуклеозида в дозах, вызывающих максимальную гибель клеток.

в фазе S резко уменьшалась и в последующие часы происходило увеличение митотического индекса в 2 раза.
Следовательно, клетки, временно блокированные в фазе S, синхронно вступали в митоз. Подсчет индекса метки, митотического индекса и процента меченых митозов отчетливо показал увеличение продолжительности фазы S и, следовательно, торможение синтеза ДНК. Однако при подсчете числа гранул торможение включения 3Нтимидина не обнаруживалось. Такое положение является исключением, поскольку обычно при действии алкилирующих соединений торможение скорости синтеза ДНК, определяемое по интенсивности включения, оказывается таким же, как торможение скорости перехода клеток по фазе S, определяемое при анализе клеточной кинетики.