Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Май 2011

Эрлиха является опухолью исключительно высокочувствительной к сарколизину (JI. Ф. Ларионов, 1962). Поэтому нарушения в цикле, возникающие при действии сарколизииа на эту опухоль, характеризуют действие эффективных алкилирующих соединений. В наших опытах мышам линии BALB/c через 3 сут после перевивки 107 клеток асцитного рака Эрлиха ввели внутрибрюшинно 40 мкг сарколизииа. В различные сроки после введения сарколизииа или за 1 ч до его введения мышам ввели 5 мк Ки 3Нтимидина. Контрольным мышам вводили только 3Нтимидин. Радиоавтографы готовили по общепринятым методам. Через 3 ч после введения сарколизииа деление клеток было полностью подавлено ( 2). Поскольку средняя продолжительность фазы G2 во время введения препарата составляла 6 ч, это показывает, что сарколизин блокирует переход клеток из фа 3. Влияние сарколизина на включение 3Нтимидина в а’сцитном раке Эрлиха.

Влияние сарюолизина на митотическую активность в асцита ом раке Эрллха.
По оси абсцисс время после введения сарколизииа; по оси ординат митотический индекс в процентах к контролю.
ролю. Очевидно, накопление клеток в фазе S являлось результатом кратковременного торможения синтеза ДНК. Митотический индекс через 12 ч был резко снижен, что может являться результатом торможения синтеза ДНК или блокирования клеток в фазе G2. В пользу последнего типа нарушения говорило накопление клеток в фазе G2. Через 24 ч клетки, содержащие ДНК в количестве, соответствующем премитотическому периоду, составляли большую часть популяции, что доказывает вторичное блокирование клеток в фазе G2. Через 3 дня гистограмма распределения количества ДНК не отличалась от контрольной, что показывает восстановление в это время пролиферации. Таким образом, в клетках различного типа циклофосфамид тормозит синтез ДНК и вызывает первичное и вторичное блокирование фазы G2.

Такое нарушение можно определить как вторичное блокирование клеток в фазе G2 в отличие от первичного блокирования при действии препарата на клетки в фазе G2. Нарастание индекса метки при наличии в среде эмбихина и 3Нтимидина было одинаково в опыте и контроле, что показывает отсутствие влияния эмбихина на фазу Gi и переход из фазы Gi в фазу S. Авторы упоминают, что тиофоефамид, триэтиленмеламин и митомицин С вызывали в клеточном цикле такие же нарушения, как эмбихин.

Следовательно, эмбихин блокировал вступление в митоз клеток, находившихся во время его добавления в фазах G] и S. Препарат влиял на клетки в самом конце фазы S, поскольку наблюдалось снижение числа меченых метафаз уже в первые часы после их появления. Накопления клеток в фазе S не происходило, что исключало блокирование перехода из фазы S в фазу G2. Следовательно, эмбихин поразному влиял на фазу G2 в клетках, на которые препарат действовал в фазах Gi и S или в фазе G2. Эмбихин блокировал переход из фазы G2 в митоз только в тех клетках, которые во время его добавления находились в фазах Gi и S.

Поскольку tGa составляет 3,9 ч, это показывает, что эмбихин не влияет на переход клеток из фазы G2 в митоз. Только в очень высоких концентрациях эмбихин влиял на клетки в первой половине фазы G2 и тормозил их переход в митоз. Спустя 4 ч после введения в среду эмбихина накопление клеток в метафазе резко замедлялось, причем степень и длительность этого торможения увеличивались с возрастанием концентрации препарата. При высокой концентрации эмбихина в митоз за 32 ч вступало всего 15 клеток. С