Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Записи с меткой «ДНК»

В синхронной культуре HeLa винбластин и винкристии вызывали накопление в митозе 100 клеток при начале действия в фазах Gi, S или G2 (MadocJones, Mauro, 1968). Время вступления клеток в митоз при действии ингибиторов в течение 3 ч соответствовало ожидаемому при нормальной продолжительности фаз цикла. Винбластин вызывал гибель 99 клеток в фазе S, но не влиял на время их вступления в митоз. Таким образом, в культуре клеток митотические ингибиторы блокируют клетки в метафазе и не влияют на прохождение клетками других фаз цикла.
Существенный интерес представляют данные о влиянии митотических ингибиторов на клеточный цикл в опухолях животных и человека. В асцитном раке Эрлиха митотический индекс увеличивался приблизительно линейно в течение 8 ч после введения 12 мкг винкристина, а затем начинал падать и возвращался к исходной величине через 2638 ч (Hartenstein е. а., 1973). Максимальный митотический индекс составлял 4 после введения 1 мкг викристина и 12 после введения 2 мкг. Следовательно, 1 мкг является дозой, недостаточной для полного блокирования всех клеток в митозе. Доля клеток с количеством ДНК, соответствующем фазе G2, начинала возрастать через 8 ч и через 31 55 ч такие клетки составляли большинство популяции. Так, в контроле число клеток, содержавших 2 С ДНК, было в 2 раза больше, чем содержавших 4 С, а после введения винкристина соотношение было обратным. Следовательно, доля клеток, блокированных в фазе G2, была значительно больше, чем следовало ожидать на основании величины митотического индекса, показывающего число клеток, блокированных в метафазе. Очевидно, часть клеток, блокированных в метафазе, без деления переходят в интерфазу и на основании удвоенного содержания ДНК регистрируются как клетки в фазе G2. В опухолях человека винкристин длительно блокировал клетки в митозе (Frei е. а., 1964). Так, в раковой опухоли молочной железы человека через 6 ч после введения винкристина в дозе 0,1 мг/мг митотический индекс увеличивался до 2,4 (до введения 0,23) и оставался значительно повышенным (1,42,2) в течение 3 дней. В лимфосаркоме человека митотический индекс достигал максимума 1,75 через 12 ч после введения винкристина при очень низкой исходной величине (0,03).

Изменение состава популяции асцитного рака Эрлиха после введения блеомицина изучалось методом цитофотометрии ДНК (Nagatsu е. а., 1972). Блеомицин вызывал значительное увеличение числа клеток в фазе G2 и уменьшение их в фазе Gi. Увеличенное число клеток в фазе G2 обнаруживалось в течение 712 дней после однократного введения блеомицина. Одновременно в популяции появлялись клетки, содержавшие октаплоидное количество ДНК, и наблюдались меченые клетки, содержавшие ДНК в количестве, соответствующем фазе G2. Следовательно, часть клеток, блокированных в фазе G2, без деления переходила в фазу S. Таким образом, в клетках асцитного рака Эрлиха блеомицин вызывал длительное блокирование клеток в фазе G2.