Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Архив рубрики «Стационарная культура»

Такое нарушение можно определить как вторичное блокирование клеток в фазе G2 в отличие от первичного блокирования при действии препарата на клетки в фазе G2. Нарастание индекса метки при наличии в среде эмбихина и 3Нтимидина было одинаково в опыте и контроле, что показывает отсутствие влияния эмбихина на фазу Gi и переход из фазы Gi в фазу S. Авторы упоминают, что тиофоефамид, триэтиленмеламин и митомицин С вызывали в клеточном цикле такие же нарушения, как эмбихин.

Влияние сарюолизина на митотическую активность в асцита ом раке Эрллха.
По оси абсцисс время после введения сарколизииа; по оси ординат митотический индекс в процентах к контролю.
ролю. Очевидно, накопление клеток в фазе S являлось результатом кратковременного торможения синтеза ДНК. Митотический индекс через 12 ч был резко снижен, что может являться результатом торможения синтеза ДНК или блокирования клеток в фазе G2. В пользу последнего типа нарушения говорило накопление клеток в фазе G2. Через 24 ч клетки, содержащие ДНК в количестве, соответствующем премитотическому периоду, составляли большую часть популяции, что доказывает вторичное блокирование клеток в фазе G2. Через 3 дня гистограмма распределения количества ДНК не отличалась от контрольной, что показывает восстановление в это время пролиферации. Таким образом, в клетках различного типа циклофосфамид тормозит синтез ДНК и вызывает первичное и вторичное блокирование фазы G2.

Эрлиха является опухолью исключительно высокочувствительной к сарколизину (JI. Ф. Ларионов, 1962). Поэтому нарушения в цикле, возникающие при действии сарколизииа на эту опухоль, характеризуют действие эффективных алкилирующих соединений. В наших опытах мышам линии BALB/c через 3 сут после перевивки 107 клеток асцитного рака Эрлиха ввели внутрибрюшинно 40 мкг сарколизииа. В различные сроки после введения сарколизииа или за 1 ч до его введения мышам ввели 5 мк Ки 3Нтимидина. Контрольным мышам вводили только 3Нтимидин. Радиоавтографы готовили по общепринятым методам. Через 3 ч после введения сарколизииа деление клеток было полностью подавлено ( 2). Поскольку средняя продолжительность фазы G2 во время введения препарата составляла 6 ч, это показывает, что сарколизин блокирует переход клеток из фа 3. Влияние сарколизина на включение 3Нтимидина в а’сцитном раке Эрлиха.

По оси абсцисс время после введения сарколизииа; по оси ординат интенсивность включения в процентах к контролю.
зы G2 в митоз. Митотический индекс был резко снижен в течение 48 ч и через 72120 ч составлял всего 5 по отношению к контролю. Через 2472 ч наблюдались только патологические метафазы. Следовательно, немногочисленные клетки, входящие в это время в митоз, очевидно, погибают в метафазе.
Для определения влияния сарколизииа на синтез ДНК определяли интенсивность включения 3Нтиммдмп;. Па основании подсчета среднего числа гранул ( 3) было установлено, что через 3 ч после введения сарколизина интенсивность включения 3Нтимидина снижалась в 3 раза. Индекс метки через 3 ч составлял 55 при 44 в контроле, т. е. повышался на 25. Увеличение числа клеток, синтезирующих ДНК «ри торможении включения, можно объяснить накоплением клеток в фазе S вследствие торможения выхода из фазы S и сохранения нормальной скорости перехода клеток в эту фазу. Приводимый ниже расчет показывает, что наблюдаемое увеличение индекса метки приблизительно соответствовало тому, которое следовало ожидать при снижении скорости выхода клеток из фазы S в 3 раза (снижение числа гранул в 3 раза)» и отсутствии влияния на переход из фазы G в фазу S. Поскольку 3 ч составляют ‘/з ts, то за это время и фазу S входит 33 клеток по отношению к числу клеток, находящихся в фазе S. В результате снижения скорости синтеза ДНК в 3 раза за 3 ч синтез ДНК должны закончить 11 клеток, а не 33, как в контроле. В результате этого индекс метки должен увеличиться на 22, что близко к 25, наблюдаемым в опы те. Следовательно, подсчет числа гранул показывал степень торможения синтеза ДНК.

Через 5 ч после введения сарколизина включение 3Нтимидина в клетки не обнаруживалось и полное торможение синтеза ДНК сохранялось в течение 24 ч (см. 3). Через 48 120 ч интенсивность включения 3Нтимидина и число клеток, синтезирующих ДНК, составляли 40 по отношению к контролю. Следовательно, проявляется торможение синтеза ДНК в течение 5 сут после введения сарколизина.