Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

Архив рубрики «Совместимость»

Wheeler с соавторами (19706) изучили влияние на клеточный цикл различных производных нитрозомочевины в дозах, эквимолярных эффективной дозе бисрхлорэтилнитрозомочевины. Два соединения, образующиеся при гидролизе бисрхлорэтилнитрозомочевины, 2хлорэтилизоцианат и 2хлорэтиламин действовали на цикл так же, как исходное соединение. Очевидно, тормозящее действие бисрхлорэтилнитрозо мочевины является результатом образования этих двух соединений. Циклогексилнитрозомочевина вызывала такое же торможение перехода клеток в митоз, как бисрхлорэтилнитрозомочевина при дозе, большей в 3 раза, но при этом не влияла на переход из фазы Gi в фазу S и из фазы G2 в митоз. Интересно, что для одинакового антилейкозного действия in vivo доза циклогексилпроизводного должна быть больше в 2 раза.

Введение бисрхлорэтилнитрозомочевины мышам с асцитной лейкемией L1210 вызывало увеличение ts, которое было пропорционально дозе. При введении препарата в дозе 30 мг/кг ts увеличивалось в 3 раза (Shirakawa, Frei, 1970). По кривой меченых митозов было показано также существенное увеличение продолжительности фазы S. Авторы указывают на корреляцию длительности фазы S и. величины выжившей фракции. Так, при введении препарата в дозах 10 и 30 мг/кг увеличивалась продолжительность фазы S в Н/2 и 3 раза и снижалась выжившая фракция на 3 и 6 порядков соответственно.

Barranco и Humphrey (1971а) изучили влияние бисрхлорэтилнитрозомочевины на клеточный цикл в синхронной культуре клеток СНО хомячка при кратковременном воздействии больших доз. Клетки, обработанные в фазе Gb на 2′/г ч позже переходили в фазу S по сравнению с контролем, что соответствовало увеличению tGt в 2 раза. В клетках, обработанных в ранней фазе S, продолжительность этой фазы увеличивалась на 4 ч. Переход в митоз клеток, обработанных препаратом в фазе G2, прекращался сразу после воздействия и не возобновлялся в течение 3 ч. Если препарат действовал на клетки в митозе, то их выход из митоза (переход в фазу Gi) блокировался. Таким образом, бисрхлорэтилнитрозомочевина оказывала кратковременное (24 ч) блокирующее действие на клетки хомячка in vitro во всех фазах цикла. После прекращения торможения клетки переходили в следующую фазу, хотя в использованной дозе препарат вызывал гибель более 95 клеток. В культуре СНО бисрхлорэтилнитрозомочевина оказывает наиболее интенсивное летальное действие на клетки, находящиеся в фазе S. Поэтому блокирование клеток в фазах G1; G2 и митозе тормозит их переход в фазу S и вызывает эффект «самоограничения», т. е. торможения препаратом перехода клеток в фазу цикла, наиболее чувствительную к его летальному действию.

соединения не влиял на продолжительность жизни мышей с лейкозом. Действие циклогексилизоцианата на ts было кратковременным и через 24 ч ts не отличалось от контроля. Таким образом, в работе Bray с соавторами (1971) противоопухолевый эффект наблюдался лишь при длительном нарушении в фазе S.
Метилциклогексилнитрозомочевина в клетках лейкемии L1210 вызывала увеличение ts в 3 раза (Young, 1973). Увеличение было максимальным при введении препарата в дозе, составляющей 25 от оптимальной. Несмотря на значительный противоопухолевый эффект, увеличение ts было кратковременным и через 4 ч после введения препарата длительность фазы S нормализовалась. Интенсивность включения 3Нтимидина (импульсы/мкг ДНК) уменьшалась сразу после введения препарата и через 3648 ч составляла 5 от исходной. Поскольку ts находилось в пределах нормы, то падение включения отражает уменьшение числа клеток, синтезирующих ДНК, возникающее в результате блокирования клеток в фазе Gi или G2. Таким образом, в трех работах, посвященных изучению действия сложных производных нитрозомочевины на клеточный цикл в асцитной лейкемии L1210, было отчетливо установлено блокирование клеток в фазе S. Влияние препаратов на клетки в фазах Gj и G2 было изучено недостаточно.