Клеточные механизмы, изучение поведения клеток

В синхронизированной культуре фибробластов L5178Y синтез ДНК прекращался через 3 ч после добавления циклогексемида к клеткам в фазе S (Fujiwara, 1972). Было показано, что ингибитор не влиял на продолжение синтеза ДНК в индивидуальных репликонах и тормозил инициацию синтеза ДНК в новых репликонах. Таким образом, ингибиторы синтеза белка не только тормозят инициацию синтеза ДНК при действии на вторую половину фазы Gb но и в большинстве изученных типов клеток тормозят синтез ДНК в клетках в фазе S.
Рассмотрим работы, в которых изучалось влияние ингибиторов синтеза РНК и белка на вступление клеток в митоз. В первичной культуре почек хомячка актиномицин D даже в высокой концентрации (330 нг/мл) не влиял на переход клеток из фазы G2 в митоз. При действии на клетки в фазе S актиномицитл D тормозил их вступление в митоз. Поскольку синтез ДНК в этих клетках не был заторможен, эти данные показывают на существование вторичного блокирования клеток в фазе G2. Очевидно, синтез РНК, необходимых для митоза, заканчивался в конце фазы S. Блокирование перехода из фазы Gi в фазу S проявлялось при значительно меньших концентрациях, чем вторичное блокирование клеток в фазе G2 (Kishimoto, Lieberman, 1964). Таким образом, переход из фазы Gi в фазу S был наиболее чувствителен к актиномину D и только этот переход блокировался при действии препарата в концентрации, избирательно тормозящей синтез РНК в ядрышке. Пуромицин блокировал переход клеток из фазы G2 в митоз и был эффективен в течение всего периода G2.